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一．實(shí)驗(yàn)簡介
物體認(rèn)知實(shí)驗(yàn)方法是 1988 年由 Ennaceur 提出，它是基于嚙齒類動物天生具有的新奇偏愛性，用于檢測動物的學(xué)習(xí)記憶能力，其與傳統(tǒng)的檢測方法相比，不需給予正向( 獎賞) 或反向( 懲罰) 的刺激，也不需冗長的訓(xùn)練，動物分別根據(jù)“新舊物體”特征、位置、出現(xiàn)的順序和所處的背景對“新舊物體”進(jìn)行辨別，能夠檢測從簡單的物體識別記憶到復(fù)雜的空間、時序和情景記憶，對動物學(xué)習(xí)記憶行為實(shí)現(xiàn)精細(xì)化區(qū)分，實(shí)驗(yàn)簡單易操作。在學(xué)習(xí)記憶發(fā)生發(fā)展機(jī)制、認(rèn)知障礙防護(hù)藥物和保健品研發(fā)等方面具有重要應(yīng)用價值。
研究物體認(rèn)知實(shí)驗(yàn)方法有四種：新物體識別實(shí)驗(yàn)、物體位置識別實(shí)驗(yàn)、時序記憶實(shí)驗(yàn)和情景記憶實(shí)驗(yàn)。這四種實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)步驟和評價指標(biāo)為學(xué)習(xí)記憶研究提供一種基于動物自發(fā)行為，多模式、精細(xì)敏感的行為實(shí)驗(yàn)方法。
二．實(shí)驗(yàn)方法
1.新物體識別實(shí)驗(yàn)：
適應(yīng)期：實(shí)驗(yàn)中將動物放入沒有任何物體的實(shí)驗(yàn)箱中，每只每天 10 min，每天 1 次，連續(xù) 3 d。
熟悉期：第 4天進(jìn)行熟悉期實(shí)驗(yàn)，開始時箱中不放入任何物體，將動物放入再次適應(yīng) 2 min，動物取出后，放入兩個*相同的物體，分別記錄每只動物 5 min 內(nèi)對左側(cè)物體的探索時間( exploration time for left object，Tl) 和對右側(cè)物體的探索時間( exploration time for
right object，Tr) 。
測試期：熟悉期后將動物放回飼養(yǎng)籠中，10 min 后開始測試期實(shí)驗(yàn)。測試期時放入兩個不同的物體，其中一個物體與熟悉期的物體*相同，另外一個是新奇物體（與熟悉期物體匹配），動物放入后計時 5min，分別記錄動物在不同時間段對熟悉物體的探索時( exploration time for familiar object，Tf) 和對新奇物體的探索時間( exploration time for novel object，Tn)。探索活動定義為: 小鼠的鼻子近距離指向物體或者直接嗅、舔物體。當(dāng)其他部位接觸物體而鼻子沒有指向物體或站在物體上時非對物體的探索活動。
2.物體位置識別實(shí)驗(yàn)：
適應(yīng)期與熟悉期實(shí)驗(yàn)過程同新物體識別實(shí)驗(yàn)，而測試期與新物體識別實(shí)驗(yàn)不同，只是將熟悉期中兩個相同物體中的一個移到新的位置，動物放入后計時 5 min，分別記錄動物在不同時間段對兩不同物體的探索時間。
3.時序記憶實(shí)驗(yàn)：
時序記憶實(shí)驗(yàn)程序和上述兩種方法有所不同，實(shí)驗(yàn)流程見圖 1，包括 2 個熟悉期，即熟悉期1和熟悉期 2，其他過程基本相同。適應(yīng)期同新物體識別。 第 4 天進(jìn)行熟悉期實(shí)驗(yàn)，開始時箱中無任何物體，將動物放入再次適應(yīng) 2 min，動物取出后放入兩相同的物體，進(jìn)行熟悉期 1 實(shí)驗(yàn)，分別記錄 5 min 內(nèi)對兩個*相同物體的探索時間; 將動物取出后放
入飼養(yǎng)籠中，10 min 后進(jìn)行熟悉期 2 實(shí)驗(yàn)，在同一個實(shí)驗(yàn)箱中放入另外兩個*相同的物體（與熟悉期1 中物體匹配），分別記錄 5 min 內(nèi)對兩個*相同物體的探索時間。熟悉期 2 后將動物放回飼養(yǎng)籠中，10 min 后開始測試期實(shí)驗(yàn)。測試期時放入兩個不同的物體，分別是熟悉期 1 和熟悉期 2 中各一個物體，動物放入后計時 5 min，分別記錄在不同時間段對兩不同物體的探索時間
4.情景記憶實(shí)驗(yàn)：
情景記憶實(shí)驗(yàn)程序與時序記憶實(shí)驗(yàn)類似，也包括2 個熟悉期，但在不同背景的實(shí)驗(yàn)箱中進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)流程見圖 2。適應(yīng)期實(shí)驗(yàn)將動物放入具有種背景的實(shí)驗(yàn)箱中，適應(yīng)完成 10 min 后，再放入第二種背景的實(shí)驗(yàn)箱中，每種實(shí)驗(yàn)箱適應(yīng)過程與新物體識別中適應(yīng)期實(shí)驗(yàn)相同。第 4 天開始熟悉期實(shí)驗(yàn)，在具有種背景的實(shí)驗(yàn)箱中放入兩相同的物體，進(jìn)行熟悉期 1 實(shí)驗(yàn)，分別記錄 5 min 內(nèi)對兩個*相同物體的探索時間; 將動物放回飼養(yǎng)籠中，10 min 后進(jìn)行熟悉期 2 實(shí)驗(yàn)，在具有第二種背景的實(shí)驗(yàn)箱中放入另外兩個*相同的物體( 與熟悉期 1 中的物體匹配) ，分別記錄 5 min 內(nèi)對兩相同物體的探索時間。熟悉期 2 后將動物取出放入飼養(yǎng)籠中，10 min 后進(jìn)行測試期實(shí)驗(yàn)，計時 5 min，分別記錄在不同時間段
對兩不同物體的探索時間。
不同時間間隔時的物體辨別記憶能力考察將動物隨機(jī)分為 5 組，熟悉期與測試期間隔分別設(shè)置為 10 min，30 min，60 min，90 min，120 min。
實(shí)驗(yàn)步驟與新物體識別實(shí)驗(yàn)相同，僅每組動物檢測時熟悉期與測試期間隔不同。記錄每組動物在 5min 測試期中不同時間段對兩不同物體的探索時間。
